高效液相色譜檢測技術(shù)
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  • 高效液相色譜(HPLC)檢測技術(shù)是一種基于液相色譜原理的高效分離分析手段,廣泛應用于化學、生物、醫(yī)藥、環(huán)境等領(lǐng)域。其核心原理是通過高壓驅(qū)動流動相攜帶待測組分通過色譜柱,利用不同組分在固定相與流動相之間分配系數(shù)的差異實現(xiàn)分離,再通過檢測器對分離后的組分進行定性和定量分析。

    HPLC系統(tǒng)主要由高壓輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。其中,高壓泵可提供穩(wěn)定的高流速(通常為1-5 mL/min),確保快速分離;色譜柱填充粒徑為2-5 μm的硅膠或聚合物固定相,顯著提升分離效率;檢測器類型多樣,紫外-可見(UV-Vis)檢測器應用最廣,二極管陣列檢測器(DAD)可獲取全波長光譜信息,質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-MS)則兼具高靈敏度和結(jié)構(gòu)鑒定能力。

    該技術(shù)的核心優(yōu)勢體現(xiàn)在三個方面:①分離效能高,理論塔板數(shù)可達數(shù)萬每米;②檢測靈敏度高,可檢測μg/L級甚至更低濃度的物質(zhì);③分析速度快,常規(guī)分析可在10-30分鐘內(nèi)完成。在制藥領(lǐng)域,HPLC被用于原料藥純度檢測、藥物代謝研究;在食品安全中可檢測農(nóng)藥殘留、添加劑;環(huán)境監(jiān)測方面能精準分析水體中的有機污染物。

    近年來,HPLC技術(shù)持續(xù)創(chuàng)新發(fā)展。超高效液相色譜(UHPLC)采用亞2 μm填料和更高壓力(1200 bar以上),將分析時間縮短至傳統(tǒng)HPLC的1/3;二維液相色譜(2D-LC)通過正交分離顯著提升復雜樣品的分離能力;智能系統(tǒng)集成自動進樣、在線前處理及AI數(shù)據(jù)分析,推動分析過程向自動化、智能化方向發(fā)展。隨著新材料和新檢測技術(shù)的應用,HPLC在精準醫(yī)療、組學研究等新興領(lǐng)域正發(fā)揮更重要的作用。

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