科普：液相色譜 - 質(zhì)譜聯(lián)用檢測的譜庫檢索怎么用？

在食品安全、環(huán)境監(jiān)測、藥物研發(fā)等領(lǐng)域，LC-MS憑借其高分離能力（液相色譜）和高靈敏度、高特異性（質(zhì)譜）成為核心分析工具。當(dāng)面對復(fù)雜樣品中未知或目標(biāo)化合物時，“譜庫檢索”是解讀質(zhì)譜數(shù)據(jù)的關(guān)鍵步驟。

譜庫檢索是什么？怎么用？

1.基本原理：LC-MS分析時，化合物在質(zhì)譜儀中被電離并碎裂，產(chǎn)生獨特的“指紋”——質(zhì)譜圖（包含母離子和碎片離子信息）。譜庫是包含大量已知化合物標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖（通常包含保留時間、母離子質(zhì)荷比、碎片離子質(zhì)荷比及豐度）的數(shù)據(jù)庫。

2.檢索過程：

*數(shù)據(jù)采集：儀器分析樣品，獲得每個色譜峰對應(yīng)的質(zhì)譜圖。

*峰提?。很浖R別色譜圖中的峰。

*譜圖匹配：對于每個色譜峰對應(yīng)的實驗質(zhì)譜圖，軟件將其與譜庫（如NIST庫、Wiley庫、或機構(gòu)自建庫）中的標(biāo)準(zhǔn)譜圖進行比對計算。

*匹配度計算：軟件算法（常見如點積、概率匹配）計算實驗譜圖與庫中譜圖在以下方面的相似度：

*碎片離子匹配度：關(guān)鍵指標(biāo)！實驗譜圖中檢測到的碎片離子（質(zhì)荷比和相對豐度）與標(biāo)準(zhǔn)譜圖有多接近。

*母離子匹配：實驗測得的母離子質(zhì)荷比是否與標(biāo)準(zhǔn)譜圖一致（考慮儀器質(zhì)量精度）。

*保留時間（可選）：如果譜庫包含該化合物在特定色譜條件下的保留時間信息，軟件也會比較實驗保留時間與預(yù)期值的接近程度（但不同實驗室條件差異大，此信息常作參考）。

*結(jié)果輸出：軟件會按匹配度高低（通常用百分比或分?jǐn)?shù)表示）列出最可能的候選化合物列表及其匹配度值。

廣州中森檢測匹配度解讀關(guān)鍵點

在解讀廣州中森檢測等專業(yè)機構(gòu)提供的LC-MS譜庫檢索報告時，需重點理解“匹配度”的含義和局限性：

1.匹配度數(shù)值：這是軟件計算出的實驗譜圖與標(biāo)準(zhǔn)譜圖相似性的量化指標(biāo)（如90%，85%）。數(shù)值越高，說明實驗譜圖與庫中該化合物的標(biāo)準(zhǔn)譜圖越相似。

2.核心是碎片離子匹配：高匹配度主要源于碎片離子模式（“指紋”）的高度吻合。這是化合物鑒定的最強有力證據(jù)之一。

3.反向匹配度（ReverseFit）與正向匹配度（ForwardFit）：

*反向匹配度（更關(guān)鍵）：衡量實驗譜圖中檢測到的離子，有多少比例能在標(biāo)準(zhǔn)譜圖中找到，且豐度比例相似。高反向匹配度（通常要求>70%或更高）意味著實驗譜圖的主要特征都被標(biāo)準(zhǔn)譜圖覆蓋，是可靠性的重要指標(biāo)。

*正向匹配度：衡量標(biāo)準(zhǔn)譜圖中的離子，有多少比例在實驗譜圖中被檢測到。它可能因樣品基質(zhì)干擾或儀器靈敏度而降低。

4.母離子質(zhì)量精度：報告中會給出實驗測得的母離子質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn)理論值的偏差（單位通常是ppm或mDa）。偏差越小（如<5ppm），說明母離子質(zhì)量測定越準(zhǔn)確，匹配結(jié)果越可靠。

5.保留時間一致性（RTMatch）：如果提供，看實驗保留時間與標(biāo)準(zhǔn)品/數(shù)據(jù)庫預(yù)期保留時間的差異。在相同色譜條件下，良好的一致性（如±0.1-0.2分鐘內(nèi)）能增加鑒定信心。

6.綜合判斷是關(guān)鍵：

*高匹配度（尤其反向匹配度高）+母離子質(zhì)量準(zhǔn)確+保留時間一致→鑒定結(jié)果非?？煽俊?/p>

*匹配度高但母離子偏差大或保留時間差異大→需謹(jǐn)慎，可能是同分異構(gòu)體或干擾物。

*匹配度中等→結(jié)果提示性，需結(jié)合其他信息（如標(biāo)準(zhǔn)品驗證、二級質(zhì)譜解析、其他檢測方法）確認(rèn)。

*低匹配度→通常認(rèn)為未匹配到可靠結(jié)果，該峰可能是未知物或需要更深入解析。

總結(jié)：LC-MS譜庫檢索是快速識別化合物的利器。廣州中森檢測等機構(gòu)提供的匹配度報告，核心在于解讀碎片離子匹配度（特別是反向匹配度）、母離子質(zhì)量精度和保留時間一致性。務(wù)必綜合這三方面信息，而非只看單一的匹配度百分比，才能對“檢出的是什么”做出更準(zhǔn)確、更可靠的判斷。高匹配度是重要線索，但最終確認(rèn)往往需要標(biāo)準(zhǔn)品比對等補充證據(jù)。