





山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟(jì)南。公司是集化學(xué)科研、開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。我公司擁有的生產(chǎn)設(shè)備,工業(yè)級(jí)亮藍(lán)批發(fā),完善的產(chǎn)品檢測(cè)手段和體系。我公司的員工具有較強(qiáng)的責(zé)任感。經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類(lèi)上百個(gè)品種。公司本著“誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)、專(zhuān)注品質(zhì)”的宗旨,參與到激烈的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)中來(lái),以好的產(chǎn)品質(zhì)量,遵義工業(yè)級(jí)亮藍(lán),優(yōu)惠的產(chǎn)品價(jià)格,令人滿(mǎn)意的銷(xiāo)售服務(wù),贏得大家的支持與信賴(lài)。山東富舜新材料科技有限公司的誠(chéng)信、實(shí)力和產(chǎn)品質(zhì)量獲得業(yè)界的認(rèn)可。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導(dǎo)和業(yè)務(wù)洽談。
考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的原理是什么
在酸性條件下,考馬斯亮蘭G-250染料與蛋白質(zhì)疏水區(qū)結(jié)合,導(dǎo)致da吸收峰由465 nm 變?yōu)?95 nm,同時(shí)顏色也由棕色變?yōu)樗{(lán)色,該藍(lán)色化合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度的高低成正比關(guān)系。將蛋白質(zhì)樣品或稀釋的BSA 與Bradford試劑混合,測(cè)量在595 nm處的吸收值,在建立由一系列稀釋的BSA建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的情況下,蛋白質(zhì)的濃度可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)而確定。
考馬斯亮藍(lán)G-250(Coomassie brilliant blue G-250)測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。在游離狀態(tài)下呈紅色,da光吸收在488nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,蛋白質(zhì)-色素結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下有da光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,因此可用于蛋白質(zhì)的定量測(cè)定。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍(lán)G-250結(jié)合在2min左右的時(shí)間內(nèi)達(dá)到平衡,完成反應(yīng)十分迅速;其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。
該法是1976年Bradford建立,試劑配制簡(jiǎn)單,操作簡(jiǎn)便快捷,反應(yīng)非常靈敏,靈敏度比Lowry法還高4倍,可測(cè)定微克級(jí)蛋白質(zhì)含量,測(cè)定蛋白質(zhì)濃度范圍為0~1 000μg/mL,xaio可測(cè)2.5μg/mL蛋白質(zhì),是一種常用的微量蛋白質(zhì)快速測(cè)定方法。
考馬斯亮藍(lán)有G250和R250兩種。其中考馬斯亮藍(lán)G250由于與蛋白質(zhì)的結(jié)合反應(yīng)十分迅速,常用來(lái)作為蛋白質(zhì)含量的測(cè)定??捡R斯亮藍(lán)R250與蛋白質(zhì)反應(yīng)雖然比較緩慢,但是可以被洗脫下去,所以可以用來(lái)對(duì)電泳條帶染色。


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考馬斯亮藍(lán)染色?使用說(shuō)明:
? 1.?常規(guī)染色脫色方法:
? a.?電泳結(jié)束后,工業(yè)級(jí)亮藍(lán)價(jià)格,取凝膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
?b.?置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫染色1小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間。? 注:具體的染色時(shí)間取決于凝膠的厚度和染色時(shí)的溫度。凝膠較厚,溫度較低,則染色時(shí)間宜適當(dāng)延長(zhǎng)。凝膠較薄,溫度較高,則染色時(shí)間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近,在染色液中幾乎看不清凝膠時(shí),可以認(rèn)為已染色充分。染色2-4個(gè)小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間不會(huì)對(duì)終的染色效果產(chǎn)生fu面影響。?
c.?倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。
? d.?加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。
? e.?置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫脫色4-24小時(shí)。期間更換脫色液2-4次,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1-2小時(shí)后即可出現(xiàn)。? 注:脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色。脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。
? f.?完成脫色后,可以把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保? 存在含20%甘油的水中。長(zhǎng)期保存可以制備干膠。?
2.?快速染色脫色方法:?
a.?電泳結(jié)束后,取膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中,微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。通常對(duì)于膠濃度大于10%的膠比較堅(jiān)韌,在發(fā)生煮沸時(shí)不易破損;對(duì)于膠濃度小于10%的膠,宜盡量避免煮沸,以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。
?b.?隨后在染色液溫度較高的情況下,在室溫?fù)u床上搖動(dòng)5-10分鐘。
? c.?倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。
? d.?加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
? e.?微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。
? f.?隨后在脫色液溫度較高的情況下,在搖床上搖動(dòng)5-10分鐘。此時(shí)通??梢杂^察到比較清楚的蛋白條帶。
? g.?更換新鮮的脫色液,重復(fù)步驟e和步驟f,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。?


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天然色素對(duì)水基本不溶解,但其配糖體能溶解于水,并與纖維吸附,要求采用后媒染使之固著,如梔子、其染色步驟如下:染色:被染織物在染液中沸染20~30分鐘。媒染:在室溫條件下進(jìn)行,依色澤的不同采用不同的媒染劑,媒染劑一般可用含鋁、鐵、錫等金屬離子的化學(xué)品。即把煮染過(guò)的織物或服飾放在含有媒染劑溶液中浸漬30~40分鐘,就完成了媒染過(guò)程。水洗:媒染后需要把染色物再投入水中再清洗一下,取出即可。











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